利用血細胞計數板進行直接計數。
計數前需對樣品做適當稀釋,然后將經過適當稀釋的菌懸液(或孢子懸液)放在血細胞計數板的計數室內,按照在顯微鏡下觀察到的微生物數目代入計算公式運算后,即可得出單位體積微生物總數目。
此法的優點是直觀、快速。
用于直接測數的菌懸液濃度一般不宜過低或過高(常大于106個/mL)。活躍運動的細菌應現用甲醛殺死或適度加熱以停止其運動。
顯微計數法適用于各種含單細胞菌體的純培養懸浮液,如有雜菌或雜質,常不易分辨。
菌體較大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球計數板,一般細菌則采用彼得羅夫·霍澤(Petrof Hausser)細菌計數板。
兩種計數板的原理和部件相同,只是細菌計數板較薄,可以使用油鏡觀察。而血球計數板較厚,不能使用油鏡,計數板下部的細菌不易看清。
每個方格網共分九個大方格,中間的方格即為計數區。
計數區分為16個中方格,而每個中方格又分成25個小方格,即計數區都由400個小方格組成。
每毫升菌懸液中含有細胞數=每個小格中細胞平均數(N)3 系數(Κ )3 菌液稀釋倍數(d)。