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上海恒遠(yuǎn):雞白介素2ELISA試劑盒放價(jià)熱賣中!

  • 發(fā)布日期:2012-07-17      瀏覽次數(shù):1071
    • 產(chǎn)品名稱:雞白介素2ELISA試劑盒 

      樣品形式:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請咨詢)
      保存與運(yùn)輸:短期4℃/長期-20℃保存
      應(yīng)用范圍:科研用檢測試劑
      檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
      保存:2-8℃               

       雞白介素2ELISA試劑盒 操作注意事項(xiàng)

       
      ●   試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
      ●   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
      ●   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
      ●   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
      ●   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
      ●   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
      ●   加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
      ●   按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。 
       
      安全性
       
      1.   避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
      2.   實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
      3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
       
      試劑的準(zhǔn)備
       
      1.   標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
      300
      pg/ml
      (6號標(biāo)準(zhǔn)品)
      原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
      150
      pg/ml
      (5號標(biāo)準(zhǔn)品)
      100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      75
      pg/ml
      (4號標(biāo)準(zhǔn)品)
      100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      37.5
      pg/ml
      (3號標(biāo)準(zhǔn)品)
      100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      18.5
      pg/ml
      (2號標(biāo)準(zhǔn)品)
      100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      9.25
      pg/ml
      (1號標(biāo)準(zhǔn)品)
      100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      0
      pg/ml
      (空白對照)
      原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
       
       
      2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
       
      試劑盒性能
       
      1.   靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
      2.   特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

      3.   重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
       

       
      1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
      2.   根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
      3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
      4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
      6.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      7.   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
      8.   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
      9.   在450nm波長處測定各孔的OD值。
       
      結(jié) 果 判 斷 與 分 析
       
      1、 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
      2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
      3、 檢測值范圍: 0-300pg/ml
      4、 敏感度:1.0pg/ml

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