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恒遠分析血液DNA提取試劑盒說明書

  • 發布日期:2014-10-13      瀏覽次數:776
    • 血液DNA提取試劑盒特點
      本產品是基于離心柱/硅膠膜原理的、專門用于從新鮮或冷凍的動物(包括人和禽類)抗凝全血中提取基因組DNA的試劑。它具有下列特點:
      1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
      2.產量高,一般為1-10 ug/mL全血(對哺乳動物血液)。
      3.操作簡單,整個過程約20分鐘,全室溫操作,適合大規模樣品處理。
      4.用量廣泛, 每次可以處理少達20 uL(對禽類動物血液), 多達1 mL的血液(對哺乳動物血液)。
      5.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。

      規格及成分
      成   份    50次包裝
      溶液A    25mL
      溶液B    25 mL
      離心吸附柱    50套
      通用洗柱液    50mL
      通用洗脫液    5 mL
      使用手冊    1份
      運輸及保存
      常溫運輸、4℃保存,有效期一年

      血液DNA提取試劑盒使用方法
      1.在0.02-1 mL新鮮或抗凝血液(冷凍血需先37℃水浴融化)中加入0.5 mL溶液A,吹打混勻。
      a)哺乳動物,血液使用量以300 uL以下為宜,使用量越大產量越高,但產率會降低。如果血液多于300 uL,重復1-2步兩次可以提高產率。
      b)禽類動物,血液使用量以20 uL以下為宜,可以從第3步做起。
      2.室溫12,000-15,000 rpm離心2分鐘,沉淀呈粉紅色,小心傾去上清。
      3.再短暫離心半分鐘,吸棄殘留的液體。此步有利于后面的細胞裂解,但一般可以省略。
      4.向有沉淀的離心管內加入0.5 mL溶液B(溶液B有少量晶體沉淀,用前需要搖晃均勻),用移液槍吹打使沉淀充分懸浮起來。此步目的是裂解細胞,釋放DNA,所以吹打越充分越好。
      5.靜置2分鐘待溶液變清亮后,將液體轉移到離心吸附柱中并靜置2-5分鐘,以使DNA與膜充分結合。
      6.12,000 rpm離心半分鐘,DNA將吸附到膜上,棄收集管中的廢液。
      7.加入0.7 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,棄收集管中的廢液。
      8.加入0.3 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,棄收集管中的廢液。
      9.12,000 rpm離心半分鐘,甩干殘留液體。此步很重要,以去除膜上殘留通用洗柱液,否則會影響后續反應。
      10.將離心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料離心管(自備)中,加入適量50 uL通用洗脫液,室溫放置2分鐘。如果將通用洗脫液在65℃預熱后再使用,洗脫DNA的效果會更好。
      11.12,000 rpm離心半分鐘,離心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱長期保存。
      上海恒遠生物提供血液DNA提取試劑盒-柱式 Column Blood DNAout