對于新入行不久,對ELISA的結果分析這塊不太熟悉。客戶的實驗是通過人源的蛋白作為抗原,兔源多克隆抗體作為一抗(我們就是為了通過做ELISA來檢測其效價),然后通過辣根過氧化物作為二抗及顯色組分。實驗做完了,但不知道怎么分析結果,例如標準曲線怎么做之類的。另外,還想問一下,有沒有實用的軟件可用來分析。對于客戶的問題上海恒遠回答:
間接ELISA要是試劑盒,會有標準品的,把標準品按一定濃度梯度稀釋一塊兒做(一般有三個重復),zui后酶標儀或分光光度計比色,用軟件(oringe)繪制標準曲線,的出公式,按公式將樣品帶入公式,
用于ELISA結果計算zui方便的是logit曲線。曲線的橫坐標用標樣各濃度(ng/ml 或其他單位)的自然對數表示,縱坐標用各濃度顯色值的logit值表示。Logit值的計算方法如下:
B/B0 B
Logit(B/B0)=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的顯色值,B是其它濃度的顯色值。
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