歐陽教授針對馬老師Elisa實驗“花板“問題講座

近日，歐陽教授針對農(nóng)科院馬老師做elisa試劑盒實驗“花板"問題進行實驗講座。關(guān)于ELISA試劑盒結(jié)果“花板"的問題對檢測數(shù)據(jù)造成了很大影響，往往會使檢測者做出誤判，是實驗中必須要注意和避免的。

馬老師使用ELISA試劑盒對血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等實驗檢測的結(jié)果中，空白和陰性，陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心提供的數(shù)據(jù)，HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常范圍均為2NCU，但血液標(biāo)本孔的OD值比較高（大多數(shù)OD值≥0.070）。標(biāo)本的陽性率很高，每板除對照孔外，有時陽性高達10孔之多，而大多數(shù)真陽性標(biāo)本都出現(xiàn)弱陽性結(jié)果。

歐陽教授針對這種“花板"現(xiàn)象我們通過多次實驗的分析和判斷，總結(jié)了一些經(jīng)驗，分析如下：

1 標(biāo)本、試劑、儀器

1.1 標(biāo)本 出入境人員的血液標(biāo)本。

1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的ELISA試劑盒。

1.3 儀器 LD4-2型腦心機BID RAD1575型洗板機BID RAD550酶標(biāo)儀。

2 方法

所有被檢出入境人員的血液標(biāo)本，按照各個廠家提供的ELISA試劑盒說明書進行HBsAg-HCV-HIV梅毒等檢驗項目操作。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

3 結(jié)果

所使用不同廠家的試劑有時會出現(xiàn)“花板"問題。

4 分析

在所有標(biāo)本進行檢測的過程中，所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下，步驟均按照各種試劑說明書的要求去做，排除實驗所用儀器和操作步驟對實驗結(jié)果的影響外，ELISA試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常，只有檢測的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國家和疾控中心報告陽性率的比例不應(yīng)該是很高的情況下，HBsAg在用ELISA之前都經(jīng)過了快速金標(biāo)試劑的檢測，陽性標(biāo)本得到了一定的控制。因此，原因可能是在標(biāo)本的處理，特別是放置時間、離心速度和離心時間方面的問題。所以，標(biāo)本的處理就成為實驗結(jié)果的主要可疑因素。

為了避免“花板"現(xiàn)象的出現(xiàn)，降低檢測的假陽性率，獲取準確的實驗結(jié)果，應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便省時的ELISA試劑。上海恒遠生物專業(yè)代理美國品牌試劑盒，獲得各單位大力認可，我司提供的實驗結(jié)果，讓您的實驗無后顧之憂。