廣州研究團隊成功利用TALEN技術在小型豬中敲除了RAG基因

據上海恒遠生物報道：中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學博士的研究團隊成功利用TALEN技術在小型豬中敲除了RAG基因(Recombination activating GENE，重組激活基因)，獲得了重癥聯合免疫缺陷小型豬模型，該研究成果于6月27日在線發表在免疫學專業雜志Journal of immunology上。

團隊主要成員楊化強博士、黃姣博士等分別針對豬的RAG1和RAG2的外顯子設計了TALEN質粒對，對豬的胎兒成纖維細胞進行轉染后獲得雜合和純合的RAG1/2敲除的細胞克隆。細胞克隆用于體細胞核移植后獲得27頭克隆豬，其中有10頭為RAG2單等位堿基缺失，9頭為RAG1雙等位堿基缺失，3頭為RAG2雙等位堿基缺失，這些堿基缺失都導致了外顯子讀碼框移碼。RAG1/2雙等位敲除豬表現出了典型的重癥聯合免疫缺陷疾病(Severe combined immunodeficiency disease, SCID)特征，包括胸腺weisuo，脾臟發育不良，淋巴細胞減少，體細胞基因組V(D)J重排消失，無成熟的T、B細胞。



免疫缺陷性動物是指先天遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統組成成分缺陷的動物，重癥聯合免疫缺陷疾病,即SCID小鼠被廣泛運用于感染免疫、炎癥、腫瘤和干細胞等相關研究。但小鼠在體型、壽命和對炎癥的免疫反應機制等與人類相差較大，在疫苗的開發、藥物篩選與臨床評價、干細胞治療的長期跟蹤等與人類臨床相關的研究中受到局限。由于豬在體型、壽命、生理指標，特別是免疫機制等與人類相近，該研究成功建立的RAG敲除的SCID小型豬模型有望在生物醫藥和轉化醫學中發揮重要作用。

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